背景

2021年，F(xiàn)DA（美國食品藥品監(jiān)督管理局）公布了一封針對浙江某制藥企業(yè)的警告信。由于該企業(yè)未能按照 21 CFR 211.84(d)(1)和(2)對供應(yīng)商入廠API（原料藥，藥物活性成分）進(jìn)行可靠性檢驗(yàn)分析，被懷疑為藥品摻假。最后，F(xiàn)DA在信中要求該企業(yè)“應(yīng)承諾：對于每個(gè)入庫的組分批次，至少進(jìn)行一個(gè)特定的鑒別檢驗(yàn)。”。

眾多制藥企業(yè)在來料檢測中使用拉曼光譜法，在2020年版《中國藥典》中也特別提到了：“拉曼光譜法既適合于化學(xué)鑒別和固體性質(zhì)如晶型轉(zhuǎn)變的快速和非破壞性檢測，也能夠用于假藥檢測和質(zhì)量控制。”

盡管拉曼光譜可以鑒別小分子原料藥或者輔料，而對于抗體藥物這樣的大分子藥物，往往非常困難，導(dǎo)致缺少解決方案。在這種情況下，企業(yè)不得不將大分子藥物原料抗體送入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行傳統(tǒng)方法檢測，如SEC（體積排阻色譜法）、CE（毛細(xì)管電泳法）等，需要消耗大量時(shí)間、人力和試劑；如果進(jìn)行PMF（肽譜分析），則會變成一項(xiàng)龐大的工程，進(jìn)一步提高成本，延遲來料等待時(shí)間。

因此，我們提出使用低場核磁共振技術(shù)，對抗體藥物的原料進(jìn)行入庫無損鑒定。

低場核磁共振技術(shù)的應(yīng)用原理

低場核磁技術(shù)在材料化工和食品工業(yè)中已有長時(shí)間的應(yīng)用，原理是核磁信號對樣品氫質(zhì)子進(jìn)行區(qū)分，用以定性分析；或者是信號量與氫質(zhì)子量的線性關(guān)系則可以用來對樣品含量進(jìn)行定量。如GB/T 6504-2008《化學(xué)纖維含油率試驗(yàn)方法》、GB/T 31743-2015《動(dòng)植物油脂 脈沖核磁共振法測定固體脂肪含量 直接法》等。

而在制藥領(lǐng)域，低場核磁技術(shù)也被應(yīng)用于藥物水分含量與水分分布，多晶型的定性定量分析，以及臨床前實(shí)驗(yàn)中小動(dòng)物成像及體脂率的測定等。

低場核磁共振技術(shù)篩選和鑒別抗體

抗體無需打開包裝，可直接置于樣品管。

測試2批次十個(gè)mAb單抗樣品的T2弛豫時(shí)間，可以對樣品進(jìn)行快速的分類和篩選，并且可以明顯區(qū)分不同的抗體樣品。

整體測試過程無需前處理，并沒有對樣品進(jìn)行侵入和損毀，全部樣品測試時(shí)間僅需半小時(shí)。

總結(jié)

低場核磁共振技術(shù)可對抗體進(jìn)行無損鑒定，避免損失昂貴而少量的抗體原料，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，弛豫分析可有效區(qū)分不同抗體樣品。如果進(jìn)一步引入標(biāo)準(zhǔn)品，可對樣品成分定量，還可用于藥物的質(zhì)量控制。總之，低場核磁共振技術(shù)在應(yīng)對抗體藥物來料入庫時(shí)，可以滿足藥品監(jiān)管要求，并在此基礎(chǔ)上開發(fā)更多解決方案。